Ampisilin bekerja dengan cara mengganggu kemampuan bakteri untuk membentuk dinding sel. Dinding sel bakteri sangat penting untuk kelangsungan hidup mereka. Dinding sel mencegah zat-zat yang tidak diinginkan masuk ke dalam sel mereka dan menghentikan kebocoran isi sel mereka. Ampisilin merusak ikatan yang menyatukan dinding sel bakteri. Hal ini memungkinkan munculnya lubang pada dinding sel sehingga membunuh bakteri.
