L'ampicilline agit en interférant avec la capacité des bactéries à former des parois cellulaires. Les parois cellulaires des bactéries sont vitales pour leur survie. Elles empêchent les substances indésirables de pénétrer dans leurs cellules et leur contenu de s'échapper. L'ampicilline altère les liens qui maintiennent la paroi cellulaire bactérienne. Cela permet l'apparition de trous dans les parois cellulaires et tue la bactérie.